抗肌肉特異受體酪胺酸酶抗體檢測試劑盒

抗肌肉特異受體酪胺酸酶抗體檢測試劑盒（肌無力試劑盒），用于抗musk抗體檢測，國內(nèi)部分科研項目用同款

抗肌肉特異受體酪胺酸激酶抗體又稱為抗musk抗體，這款檢測試劑盒用于重癥肌無力的分癥和程度評價，德國IBL品牌的ELISA試劑盒在內(nèi)科疾病的診斷和評估方面有定量檢測，特異好靈敏度高的優(yōu)勢，科潤達生物提供技術(shù)支持。現(xiàn)國內(nèi)部分三甲醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科應(yīng)用的就是科潤達生物代理的肌無力試劑盒。

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：肌肉特異性受體酪氨@酸激酶自身抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：MuSK-Ab ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

試劑盒可定性和定量檢測人血清中肌肉特異性受體酪氨@酸激酶自身抗體。

【前言簡介】

診斷重癥肌無力最有力的證據(jù)是病人由于免疫系統(tǒng)功能紊亂，產(chǎn)生針對自身肌肉神經(jīng)終板突觸后膜乙酰旦堿受體的自體抗體。診斷依據(jù)有臨床表現(xiàn)、實驗室檢查、血清學(xué)檢查以及診斷性治療等。證明重癥肌無力是自身免疫性疾病的臨床證據(jù)基于肌無力與疫苗注射、蚊蟲叮咬、感染及創(chuàng)傷的聯(lián)系，及其與其他自身免疫性疾病如甲狀腺功能減退、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和多發(fā)性肌炎之間的關(guān)聯(lián)。但是，10—20%的廣義重癥肌無力病人和多達50%的眼肌型重癥肌無力患者無法檢測到乙酰但堿受體抗體。這種情況通常被稱為血清反應(yīng)陰性的重癥肌無力。血清反應(yīng)陰性的重癥肌無力已被認為是一種抗體介導(dǎo)的疾病。

對于重癥肌無力病人而言，也許最重要的血清學(xué)檢查是抗乙酰旦堿受體的IgG抗體。臨床診斷為重癥肌無力的病人中大約有70%~95%該抗體檢測結(jié)果為陽性，這也是該病出現(xiàn)虛弱和易疲勞癥狀的原因。如果能夠使動物對乙酰旦堿受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，那么動物很容易出現(xiàn)重癥肌無力。實驗性重癥肌無力通常在對受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)2~3周內(nèi)出現(xiàn)，并具人類重癥肌無力的所有特征。

對免疫系統(tǒng)的操作都會引起重癥肌無力病情的這一變化，從而證實了該病為自身免疫源性疾病。胸腺切除術(shù)以及磷環(huán)酰胺、PO尼松和血漿置換等能夠在一定程度上減低過強的自身免疫反應(yīng)，是具有一定效果的治療手段.

骨骼肌特異性受體酪@氨酸激酶抗體（MuSK-Ab）已證實存在于廣義的血清反應(yīng)陰性的重癥肌無力病人的血清中（大約40%血清反應(yīng)陰性的MG病人）。MuSK是一種集聚蛋白受體復(fù)合物的一部分并且在突觸形成過程中誘導(dǎo)乙酸但堿受體的聚集，而且Musk也在成熟神經(jīng)肌肉接點（NMJ）表達。Musk MG病人大多數(shù)為女性，有顯著的頭顱和累及延髓與其他形式的MG相比會有更高的風(fēng)險。疾病的發(fā)作往往在早期，大多數(shù)病人在30-40歲出現(xiàn)癥狀。檢測MuSK抗體非常有助于MG診斷分型，預(yù)防胸腺誤切，和臨床管理MG病人。

【檢測原理】

抗肌肉特異受體酪胺酸酶抗體檢測試劑盒這款試劑盒是利用固相酶聯(lián)免疫吸附檢測試驗（ELISA）。包被孔中包被了抗原。病人樣本中的抗體結(jié)合包被孔中的抗原，并通過信號放大系統(tǒng)檢測出來。顯色反應(yīng)是通過結(jié)合到抗體的堿性磷酸酶催化的。生成的顏色強度與樣本中相應(yīng)抗體濃度成正比關(guān)系。定性或者定量結(jié)果分別通過臨界質(zhì)控或者標準曲線得到。

【試劑盒組成成分】

微孔板          12×8

包被有高度純化的重組MuSK蛋白

酶聯(lián)物         1×0.25ml

含堿性磷酸酶標記的特異性抗體

抗血清         1×13ml

含抗人免疫蛋白物、穩(wěn)定劑

標準品A~E      5×12ml

即用型 濃度0、0.4、2.5、5、12U/ml

陽性質(zhì)控        1×1.2ml

紅色 即用型

陰性質(zhì)控        1×1.2ml

綠色 即用型

分析緩沖液     1×120ml

紅色 即用型

洗滌液          1×100ml

10倍濃縮

底物液          1×13ml

即用型 含PNPP

終止液          1×15ml

含1M NaOH、0.25M EDTA

封板紙          4張

說明書          1份

需要的材料（未提供）

1) 移液器，體積5、10、20、50、100、1000ul

2) 一次性的玻璃管(12×75mm)

3) 聚丙烯（PP）管（例如Sarstedt）

4) 旋渦混合器

5) 溫育箱，37℃

6) 8通道的移液器，帶加樣槽

7) 洗瓶、自動或者半自動洗板機

8) 酶標儀

9) 雙蒸水或去離子水

10) 吸水紙、吸嘴和秒表

【儲存條件】

試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。

【檢測步驟】

1) 移取100ul的標準品、質(zhì)控品和稀釋的病人樣本至相應(yīng)的微孔中，蓋板。

2) 在定軌搖床上（500rpm）室溫（18-25℃）溫育60分鐘。

3) 棄去孔中溶液。使用稀釋的洗滌液每次250ul洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 每孔加入100ul抗血清，蓋板。

5) 在定軌搖床上（500rpm）室溫（18-25℃）溫育60分鐘。

6) 棄去孔中溶液。使用稀釋的洗滌液每次250ul洗板3次，在吸水紙上拍干。

7) 每孔加入100ul已稀釋的酶聯(lián)物，蓋板。

8) 在定軌搖床上（500rpm）室溫（18-25℃）溫育60分鐘。

9) 棄去孔中溶液。使用稀釋的洗滌液每次250ul洗板3次。在吸水紙上拍干。

10) 加底物液和終止液建議使用8通道移液器。移取底物液和終止液應(yīng)該為相同的時間間隔。避免氣泡的生成。

11) 每孔加入100ulPNPP底物液。輕輕搖動酶標板混勻溶液。

12) 在室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

13) 每孔加入100ul PNPP終止液終止顯色反應(yīng)。輕輕搖動酶標板混勻溶液。

14) 在405nm處檢測吸光度（參考波長為600—650nm），應(yīng)在加入終止液后60分鐘內(nèi)讀數(shù)。

科潤達生物是德國IBL的國內(nèi)代理商和技術(shù)支持單位，您可以在此平臺上留言或者關(guān)注我們公眾號與客服人員聯(lián)系！