食物不耐受90種抗體IBL試劑盒,酶聯(lián)免疫法定量檢測
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:88項食物篩查IgG檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:IgG Food Screen 88 ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
15x1x96T
【預(yù)期用途】
該試劑盒用于定量測量人血清和血漿(EDTA,檸檬酸鹽,肝素)中的88種食物過敏原的特異性IgG抗體。
【檢測原理】
在微孔板的每個孔包被有來自食品或食品混合物的抗原。為了測試,將血清或血漿樣品稀釋并轉(zhuǎn)移至微量滴定孔。樣品中特異性IgG(sIgG)抗體將與食品提取物的相應(yīng)抗原結(jié)合。再加入特異性辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合的抗人IgG抗體去結(jié)合并檢測人IgG。在加入底物TMB(3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)后,通過溶液的藍色顯色結(jié)合IgG抗體。加入終止溶液中斷反應(yīng),藍色變成黃色。其強度與結(jié)合抗體的量相關(guān)。通過吸光度測量來量化黃色。食物不耐受在兒童慢性腹瀉、腸易激綜合癥、小兒腹痛等疾病中的作用越來越受到重視,有研究證實:年齡越小,食物不耐受現(xiàn)象發(fā)生率越高。這是因為低齡兒童消化系統(tǒng)功能尚未健全,無法充分的消化食物,通過食物不耐受系列試劑盒的檢測,從而及早發(fā)現(xiàn)誘因,選擇安全的食物,已成為兒童健康管理的重要手段。
【貯存】
試劑盒儲存在 2-8℃ 陰涼處。所有試劑(洗滌緩沖液除外,參見試驗前說明部分)都是即用試劑,裝在試劑瓶中。
有效期印在試劑盒標簽上。試劑盒效期針對里面所有組分整體而言,不管單個組份的效期是否有別。到效期后,必須棄用所有組分。在用試劑保質(zhì)期:2-8℃ 至少 40 天,但不超過失效日期。
【試劑盒組成】
食物不耐受90種抗體IBL試劑盒含有15個微量滴定板和足夠的試劑,用于測試15個患者樣品。每個板可以測試1名患者,每個患者樣品測試88種過敏原。
【檢測步驟】
1 | 使用前,所有試劑和檢測設(shè)備必須恢復(fù)至室溫(18-30℃)至少30分鐘。 |
2 | 一個樣品一塊板。標準品和質(zhì)控放在第1板條A-H位置。見第18節(jié)板布局圖。 |
3 | 分別取100ul稀釋好的樣品和未稀釋的標準品及質(zhì)控加入到微孔板相應(yīng)孔中。 |
4 | 孵育:37℃孵育60分鐘。 |
5 | 去掉孔中樣品、標準品和質(zhì)控,并在吸水紙巾上輕輕拍打微孔板(倒扣)。 |
6 | 手動或自動洗板機每孔添加300uL洗滌液,然后去掉洗滌液。重復(fù)此洗板步驟3次。最后一次將板輕輕在吸水紙上拍打去掉孔內(nèi)及邊沿部分殘余洗液。 |
7 | 移取100uL酶聯(lián)物 |
8 | 孵育:37℃孵育60分鐘。 |
9 | 手動或自動洗板機每孔添加300uL洗滌液,然后去掉洗滌液。重復(fù)此洗板步驟3次。最后一次將板輕輕在吸水紙上拍打去掉孔內(nèi)及邊沿部分殘余洗液。 |
10 | 移取100ul TMB底物液至各孔中。 |
11 | 孵育:37℃孵育15分鐘。 |
12 | 移取100ul TMB終止液至添加底物的各孔中。 此步操作之前不要洗板!終止液可使藍色溶液變成黃色。 |
13 | 上酶標儀前檢查孔內(nèi)是占有氣泡,微孔板底部是否有刮痕、臟污等。測定450nm波長下吸光度。校正測量推薦在600-700nm下測量。 |