GUS染色液(即用型)
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
GUS染色液(即用型) | HR0258 | 50mL |
HR0258-100mL | 100mL |
產(chǎn)品描述
GUS (β -Galactosidase, β -半乳糖苷酶) 基因是存在于 E.coli 等一些細(xì)菌基因組內(nèi)的編碼 β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶，該基因常作為融合標(biāo)記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。 GUS受體基因系統(tǒng)有表達(dá) E.coli GUS 酶的穩(wěn)定性和在植物內(nèi)的低活性，絕大多數(shù)植物沒有檢測(cè)到葡萄糖苷酸酶的背景活性，以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物，其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測(cè)出來。5-Bromo- chloro-3-indolyl β-D-glucuronide，cyclo hexylammonium salt(簡(jiǎn)稱為X-G luc或 X-GlcA)分子 量為 521.8，CAS 號(hào)為18656-96-7，是檢測(cè)大腸桿菌中GUS基因的底物，可快速檢測(cè)植物中GUS基因融合標(biāo)記。
β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β -Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)簡(jiǎn)稱為 GUS 染色液 ，其染色原理是適宜的反應(yīng)條件下 β -葡萄糖苷酶(GUS)可將 X-G luc水解成藍(lán)色物質(zhì)， 該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì) ，具有 GUS 活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)，可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液可用于生物化學(xué)活性分析、免疫分析以 及組織和細(xì)胞的組織化學(xué)染色 ，多用于轉(zhuǎn)基因植物的GUS基因表達(dá)分析。
該即用型試劑比常規(guī) GUS染色液操作簡(jiǎn)便。
本產(chǎn)品僅用于科研領(lǐng)域，不用于臨床診斷。
自備用品
1.70%乙醇
2.去離子水
3.小瓶或多孔板、顯微鏡
產(chǎn)品性質(zhì)
名稱 規(guī)格 | 50ml | 100ml | Storage |
HR0258(A): X-G luc | 1 支 | 2 支 | -20℃ 避光 |
HR0258(B): X-G luc Solution | 1ml | 2 × 1ml | RT |
配制 X-G luc (50x)溶液 ：取B加至A中 ，充分溶解 ，即獲得X-G luc 溶液(50x)。 -20℃保存，1個(gè)月有效。避免反復(fù)凍融。 | |||
HR0258 (C): GUS Buffer | 50ml | 100ml | 4℃ 避光 |
配制 X-G luc 染色液：取適量 X-G luc (50x)溶液和 GUS Buffer，按1：49比例充分混勻 ， 該染色液現(xiàn)用現(xiàn)配，短期貯存可以4℃保存3天。 | |||
使用方法
1.取適量待染葉片等組織加入適量GUS染色液，使 GUS染色液浸沒組織。
2.37℃孵育1-24h ，隨著孵育時(shí)間的延長，藍(lán)色漸漸出現(xiàn)，當(dāng)表達(dá)量較高時(shí)，GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)。
3.用 70%乙醇脫去樣本的葉綠素 ，一般樣本浸沒于乙醇1～3h，至陰性對(duì)照呈白色。如有必要可重復(fù)該脫色步驟 ，以便清除葉綠素。樣本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光學(xué)顯微鏡下觀察， 白色背景上的藍(lán)色即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。
注意事項(xiàng)
1.配制好的 GUS 染色液可以 4℃避光保存3 天。
2.由于組織特異性等原因 ，藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不一致，請(qǐng)做預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索實(shí)驗(yàn)條件。
3.擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗根就可直接染色；煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉須在染色前切成薄片(1-3mm)。
4.當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí) ，可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞 ，建議采購常規(guī) GUS 染色液。
5.本產(chǎn)品僅作科研用途！
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