Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 |
Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit | HRF0194 | 100 T | -20℃ |
產(chǎn)品描述
HRbio™ Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉(zhuǎn)錄是基于HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase開發(fā)的試劑盒。與HRbio™ M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase熱穩(wěn)定性大幅度提高,可耐受高達(dá)50℃的反應(yīng)溫度,適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時(shí),該酶增強(qiáng)了與模板的親和力,適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。HRbio™ Ⅱ Reverse Transcriptase合成全長(zhǎng)cDNA的能力也有了提升,可擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)10 kb的cDNA。
試劑盒中包含由總RNA或mRNA合成高鏈cDNA所需的所有成分,并提供兩種cDNA合成引物:Random Primers N6和oligo (dT)18,合成的單鏈cDNA產(chǎn)物可直接用來進(jìn)行后續(xù)PCR或者qPCR反應(yīng)。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 |
HRF0194 (100 T) | ||
HRF0194-A | RNase-free H2O | 2×1 mL |
HRF0194-B | 5×HRbio™ Ⅱ Buffer | 400 μL |
HRF0194-C | HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix | 200 μL |
HRF0194-D | Oligo (dT)18 (50 μM) | 100 μL |
HRF0194-E | Random Primers N6 (50 μM) | 100 μL |
【注】:
1)5×HRbio™ Ⅱ Buffer中包含dNTP。
2)HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix中包含RNase inhibitor。
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。
注意事項(xiàng)
1)反應(yīng)液的配制應(yīng)在冰上操作完成,操作過程應(yīng)避免RNase污染;
2) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
3)本產(chǎn)品僅作科研用途!
Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 逆轉(zhuǎn)錄
鏈cDNA合成操作步驟
1. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制(20 μL體系)
組分 | 使用量 |
RNase-free H2O | To 20 μL |
Total RNA | 1 ng -5 μg* |
or mRNA | 1 ng-500 ng* |
5×HRbio™ Ⅱ Buffer | 4 μL |
Random Primers N6 (50 μM) | 1 μL |
or Oligo (dT)18 (50 μM) | or 1 μL |
or Gene Specific Primers (2 μM) | or 1 μL |
HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix | 2 μL |
【可省略】:若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為PCR,針對(duì)復(fù)雜模板,可將RNA、H2O、反轉(zhuǎn)錄引物在65℃孵育5 min 后,迅速冰上冷卻,然后再加入HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix;若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為qPCR,則可省略65℃孵育步驟,直接在體系中加入HRbio™ Ⅱ Enzyme Mix。
【注】:若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為qPCR,建議Total RNA 或 mRNA投入量不超過1 μg或100 ng,如果目的基因的表達(dá)豐度非常低,最多可投入5 μg Total RNA或500 ng mRNA。
天津天正信達(dá)供應(yīng):RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái),主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。