辣椒及其制品辣度ELISA檢測試劑盒
使用說明書
本品采用競爭性酶免檢測技術(shù)用于辣椒及其制品辣度的定量分析，最可滿足96次測試，在做復(fù)孔的情況下，一次最可檢測42個樣本。
產(chǎn)品特性： l 快速（＜10min）、高回收（≥80%）和高效的前處理方法 l 檢測限1度辣度，定量限2度辣度 l 快速，檢測時間30min l 高的重現(xiàn)性 |
【辣椒素辣度相關(guān)公式】 參考《GB/T 21266-2007 辣椒及其制品中 辣椒素類物質(zhì)測定及辣度表示方法》 辣椒素和二氫辣椒素是影響辣度的最主要成分，二者占辣椒素類物質(zhì)總量約90%，其余辣椒素類物質(zhì)約占10% 辣椒素或二氫辣椒素轉(zhuǎn)換為斯科維爾指數(shù)的系數(shù)：1g/kg（辣椒素或二氫辣椒素）=16.1×103 其余辣椒素類物質(zhì)轉(zhuǎn)換為斯科維爾指數(shù)的系數(shù)：1g/kg（其余辣椒素類物質(zhì)）=9.3×103 辣度與斯科維爾指數(shù)（SHU）的換算關(guān)系為：150SHU=1度 綜上，辣度與1g/kg辣椒素類物質(zhì)含量之間的換算公式 1g/kg辣椒素類物質(zhì)總量=1×0.9×16.1×103SHU+1×0.1×9.3×103SHU=15.42×103SHU=15420/150度=102.8度 1g/kg(辣椒素類物質(zhì)總量）=1000mg/kg 因此，10mg/kg辣椒素類物質(zhì)總量=1.028度，辣椒素和二氫辣椒素換算為辣椒素類物質(zhì)總量的系數(shù)：0.9 10mg/kg（辣椒素或二氫辣椒素）=1.028/0.9度=1.142度 |
請您提供產(chǎn)品貨號、批號、實驗數(shù)據(jù)等相關(guān)信息，以便能快速而高效的為您服務(wù)（貨號及批號見試劑盒外包裝） |
使用前須知 |
1. 當與儀器方法結(jié)果相比時，試劑盒的結(jié)果偏高這是很正常的現(xiàn)象。因為儀器方法僅測量的單一化合物，而試劑盒中的抗體由于不僅能識別目標分子且還能識別結(jié)構(gòu)上相似的分子，包括其相關(guān)的代謝產(chǎn)物。因此，使用人員需要明白本產(chǎn)品的局限性和對數(shù)據(jù)做出合理的分析。 2. 任何試劑、檢測程序的改變都可能導(dǎo)致檢測失敗。 3. 不要使用超過有效期的產(chǎn)品；不同批次的產(chǎn)品不得混用。 4. 實驗用水的質(zhì)量很重要，請使用蒸餾水或去離子水。 5. 微孔板開封后，需置于有干燥劑的密封袋中冷藏保存，建議于一個月內(nèi)使用完。 |
需要但未提供的設(shè)備和試劑 | |
l 酶標儀：配備450nm波長 l 單道移液器：0.5-10、20-200、100-1000μL、0.5-5mL量程各一支 l 多道移液器：30-300μL量程一支 l 白色、黃色和藍色吸頭若干 | l 恒溫培養(yǎng)箱 l 均質(zhì)器或絞肉機 l 甲醇，分析純 l 二甲基亞砜，分析純 |
1.樣本前處理 |
準備 (1) 樣本提取液 分別取甲醇70mL和二甲基亞砜 30mL混勻備用。 (2) 1×樣本稀釋液 取4×樣本稀釋液1份，加入3份去離子水混勻，比如1mL+3mL 辣椒油、火鍋底料 火鍋底料、凝固性油樣，可以加熱至樣品溶化后再稱量 (1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min; (2) 4000rpm，離心5min； (3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻； (4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻 (5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻 稀釋倍數(shù)：1 干辣椒 粉碎后，過40目篩 (1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min; (2) 4000rpm，離心5min； (3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻； (4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻 (5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻 稀釋倍數(shù)：1 新鮮辣椒以及辣椒醬等辣椒制品 在均質(zhì)器或料理機上均質(zhì)呈勻漿 (1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min; (2) 4000rpm，離心5min； (3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻； (4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻 (5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻 稀釋倍數(shù)：1
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2.檢測步驟 |
檢測前準備 l 所有試劑需回復(fù)至室溫（在20-25℃下，從試劑盒中取出并放置1-2h）; l 檢測開始前需準備好所需試劑； l 取出所需體積的試劑，其余放回盒內(nèi)； l 未使用完的試劑請勿倒回原試劑瓶內(nèi)，移取每一種試劑需更換吸頭，以免交叉污染； l 請不要在通風(fēng)口、陽光直射下檢測，以避免造成微孔微環(huán)境差異導(dǎo)致檢測失??； l 標準品、陽性樣本以及用過的吸頭和器皿均應(yīng)做有毒廢棄物處理。
洗液（1×）配制 取1體積的20×濃縮洗液，加入19體積的去離子水或蒸餾水混勻
檢測步驟 (1) (2) 移取50μL樣本至相應(yīng)微孔中； (3) 移取50μL酶結(jié)合物至所有微孔中； (4) 加入50μL辣椒素抗體至每一所需微孔中，用手指肚輕輕敲擊微孔板架兩側(cè)混勻1min； (5) 室溫（20-25℃）孵育20min； (6) (7) 加入100μL底物，室溫（20-25℃）避光孵育10min; (8) 加入100μL終止液，于450nm下讀數(shù)
結(jié)果計算 (1) 以logit(B/B0）為y軸，以log（分析物濃度）為x，進行線性擬合。 其中公式如下 a. B為標準品或樣本對應(yīng)的吸光度； b. B0為零標準品對應(yīng)的吸光度； d. K為斜率； e. C為截距 (2) 計算出樣本的平均吸度和樣本的B/B0值代入公式①中求出濃度并乘以對應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即為樣本中待測物最終濃度；辣度換算公式【求得的濃度C樣，（C樣×1.142）/10即為樣本的辣度 |
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