探針?lè)ňS容氏支原體實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma wenyonii
貨號(hào):Mqt-wen-20 規(guī)格:20個(gè)反應(yīng)
貨號(hào):Mqt-wen-50 規(guī)格:50個(gè)反應(yīng)
貨號(hào):Mqt-wen-100 規(guī)格:100個(gè)反應(yīng)
儲(chǔ)存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反復(fù)凍融。
試劑盒特點(diǎn):
1, 特異性檢測(cè)維容氏支原體,準(zhǔn)備樣品時(shí)注意不要污染其他動(dòng)物血制品。
2, 靈敏度高,反應(yīng)液中僅1個(gè)基因組時(shí)檢出率為58%。線性范圍跨越8個(gè)數(shù)量級(jí)。
3, 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力強(qiáng)和熱穩(wěn)定性好的特點(diǎn);采用熱啟動(dòng)方式,可抑制非特異性擴(kuò)增,降低背景熒光。
4, 帶有陽(yáng)性對(duì)照樣品,可用于檢驗(yàn)試劑盒有效性。
5, 帶有dUTP和UDG酶,可降低殘留DNA的污染。
嗜血支原體(Hemotropic Mycoplasma,或hemoplasma)是一類寄生于紅細(xì)胞表面的細(xì)菌,無(wú)細(xì)胞壁,可以感染很多哺乳動(dòng)物,包括貓、犬、豬、牛、羊等,也包括人類。嗜血支原體曾被命名為血巴通氏體(Hemobartonella)和附紅細(xì)胞體(Eperythrozoon),根據(jù)16S rRNA基因序列分析,被重新歸類為支原體。在牛體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)的嗜血支原體有兩種:維容氏支原體(Mycoplasma wenyonii)和Candidatus Mycoplasma haemobos。
維容氏支原體,舊稱維容氏附紅細(xì)胞體(Eperythrozoon wenyonii),也有稱為溫氏支原體、文氏支原體、溫氏附紅細(xì)胞體、維氏附紅細(xì)胞體、牛附紅細(xì)胞體、溫氏血蟲(chóng)體、文氏附紅血球體,首-次發(fā)現(xiàn)于1934年,目前為止僅在牛體內(nèi)發(fā)現(xiàn)。血涂片檢測(cè)結(jié)果顯示,其游離于血漿或附著在紅細(xì)胞表面,在全球廣泛分布,可與無(wú)形體(Anaplasma)、巴貝蟲(chóng)(Babesia)和泰勒蟲(chóng)(Theileria)形成共感染。多數(shù)情況下牛在感染后無(wú)臨床表現(xiàn),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)貧血、發(fā)熱、后肢水腫、乳頭腫脹、產(chǎn)奶量突降和體重減輕等癥狀。感染后很難完-全清除,可能終身帶菌。一般認(rèn)為吸血性節(jié)肢動(dòng)物是其傳播途徑。
維容氏支原體尚無(wú)合適的體外培養(yǎng)方法,因此難以開(kāi)發(fā)蛋白類檢測(cè)方法。檢測(cè)方法一般采用吉姆薩染色的血涂片法。血涂片法的檢測(cè)靈敏度和特異性均比較差,容易受到人工制片方法和血液里其他成分(如:Howell–Jolly體)的干擾,且支原體易從紅細(xì)胞表面脫落,造成漏檢。而PCR法在靈敏度和特異性上均有明顯的優(yōu)勢(shì),且可以區(qū)分支原體種類。定量PCR法與普通PCR法相比,不僅可以進(jìn)行定量分析,而且操作更為方便,更少受環(huán)境污染的影響。
探針?lè)ňS容氏支原體實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒基于16S rRNA基因設(shè)計(jì)特異性引物和探針,可以準(zhǔn)確識(shí)別維容氏支原體,與羊支原體(Mycoplasma ovis)、豬支原體(Mycoplasma suis)、以及寄生于梅花鹿的Candidatus Mycoplasma haemocervae和Candidatus Mycoplasma erythrocervae有交叉反應(yīng),而與Candidatus Mycoplasma haemobos及其他生物的基因組無(wú)交叉反應(yīng)。由于嗜血支原體對(duì)宿主有嚴(yán)格的特異性,檢測(cè)時(shí)只需注意嚴(yán)格操作,不污染其他動(dòng)物的血源,就不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成干擾。對(duì)不同健康狀況的牛群進(jìn)行檢測(cè),在159只患致命貧血牛中獲得133個(gè)陽(yáng)性,在57只患不相關(guān)疾病牛中獲得33個(gè)陽(yáng)性,在61只健康牛中獲得38個(gè)陽(yáng)性,而在47只健康牛犢中只獲得2個(gè)陽(yáng)性。
本產(chǎn)品僅供研究使用。
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