在生物醫(yī)藥行業(yè)中,如果我們進入一個下游工藝的實驗,一眼望去,可以看到各種各樣的填料。這些裝在瓶子里或者桶里的填料,有的透亮,有的顯示出白色。倘若有一款填料,瓦藍瓦藍的,與同類顯得格外不同,一定會吸引你的目光。這就是今天本文所介紹主角,一款親和填料——藍膠。
簡單說,藍膠是用Cibacron Blue 3GA染料分子作為親和配基的一款神奇的親和層析填料。這個染料分子天然顯示出藍色,由其制備而成的填料也就顯得瓦藍瓦藍的,這就賦予了這款填料的外號“藍膠”。
Cibacron Blue 3GA分子屬于蒽醌衍生物,分子結(jié)構(gòu)中有氨基、磺酸基和苯基,以其核苷酸特異性、離子和疏水性捕獲蛋白質(zhì)[1]。
一般來說,藍膠除了可以特異性地結(jié)合白蛋白外,也可以結(jié)合干擾素及其他血漿蛋白;另外,它對于多種蛋白酶都有著出色的結(jié)合效果,包括脫氫酶、激酶、轉(zhuǎn)移酶,以及大多數(shù)含腺苷酸的輔酶,例如NAD+。
博格隆供應(yīng)Blue Bestarose FF、Blue Bestarose HP、Diamond Blue、Diamond Blue Mustang 4款優(yōu)異的藍膠產(chǎn)品,技術(shù)參數(shù)如下表:
+接觸時間:4min
• 樣品:人血白蛋白
• 層析柱:EzFast,1 mL
• 流速:0.2mL/min
• 結(jié)合液:50mM KH2PO4,pH7.0
• 洗脫液:1.5M NaCl,50 mM KH2PO4,pH7.0
Fig. 1 Blue Bestarose FF結(jié)合洗脫圖譜
• 樣品:人血上清稀釋樣 120mL
• 層析柱:EzFast Blue FF 5mL
• 流速:1mL/min
• 平衡:20mM NaH2PO4,pH7.0
• 淋洗:20mM NaH2PO4,0.5M NaCl,pH7.0
• 洗脫:20mM NaH2PO4,2M NaCl,pH7.0
Fig. 2 EzFast Blue FF洗脫產(chǎn)物的毛細管電泳分析圖譜[2]
Fig. 3 白蛋白純化數(shù)據(jù)分析[2]
如Fig. 3所示,洗脫產(chǎn)物純度達90%,回收率為49.59%,濃度為12.08mg/mL。
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