PCR實(shí)驗(yàn)室污染事件處理！你可能缺少它！??！

PCR實(shí)驗(yàn)室污染事件處理！你可能缺少它?。。?/h2>

今天我想跟大家分享一個(gè)發(fā)生在實(shí)驗(yàn)室的核酸污染案例，從發(fā)現(xiàn)污染到處理的全過程。

核酸污染不能避免

核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的污染想全部避免是不可能的，我們能做的是隨時(shí)隨地保持警惕，盡早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)處置，盡量減少損失。

一天，一次PCR實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)員發(fā)現(xiàn)雖然陰性對(duì)照成立，但是4份陰性樣品都出現(xiàn)了擴(kuò)增曲線。可以說實(shí)驗(yàn)中肯定發(fā)生了污染，但是污染是從何時(shí)開始的？污染源是什么？試驗(yàn)被影響到的有多少？我們需要一一排查。

仔細(xì)排查和清潔

1.實(shí)驗(yàn)活動(dòng)全部停止，查看當(dāng)天所有的試驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)受到污染的只有一個(gè)實(shí)驗(yàn)。

2.開封的試劑耗材全部清理包括試劑準(zhǔn)備區(qū)、核樣本制備區(qū)和擴(kuò)增區(qū)；

3.試管架、離心管架等可重復(fù)使用的物品浸泡到84消毒液中過夜，直到第二天用清水清洗晾曬后使用，注意一定要曬干；

4.用酒精對(duì)核酸提取儀內(nèi)部、移液器內(nèi)外表面擦拭，再用核酸去除劑擦拭，同時(shí)啟用備用的移液器；

5.用酒精對(duì)各區(qū)的生物安全柜、潔凈工作臺(tái)和實(shí)驗(yàn)臺(tái)面擦拭后，再用核酸去除劑擦拭；

6.用84消毒液對(duì)實(shí)驗(yàn)室地面進(jìn)行清潔；

7.開窗，通風(fēng)排氣。

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在這里，我要推薦一下博科核酸清除劑

適用于PCR實(shí)驗(yàn)室儀器、耗材和空氣氣溶膠等的核酸清除，可有效降低環(huán)境中核酸污染對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的干擾。

污染清除的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

1.把開蓋裝有PBS的離心管放置在試劑準(zhǔn)備區(qū)的潔凈工作臺(tái)面、核酸提取儀內(nèi)部、擴(kuò)增區(qū)臺(tái)面、樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)部，過夜；

潔凈工作臺(tái)面

生物安全柜內(nèi)部

核酸提取儀內(nèi)部

擴(kuò)增區(qū)臺(tái)面

2.在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、生物安全柜臺(tái)面和潔凈工作臺(tái)面用采樣拭子蘸PBS反復(fù)擦拭后，放入PBS中進(jìn)行洗脫。

生物安全柜臺(tái)面取樣

取樣后洗脫

3.用采樣拭子蘸PBS后對(duì)移液器的內(nèi)外表面進(jìn)行取樣，取樣后放入PBS中進(jìn)行洗脫。

移液器內(nèi)表面取樣

4.將配液的移液器和加模板的移液器換上無濾芯槍頭，在PBS中反復(fù)吹吸10次，測(cè)試移液器內(nèi)部是否存在污染。

測(cè)試配液的移液器

測(cè)試結(jié)果

1.測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器內(nèi)外表面擦拭拭子為核酸陽性，其他檢測(cè)都是陰性。

實(shí)驗(yàn)室污染測(cè)試結(jié)果

2.對(duì)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后，第二天對(duì)該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測(cè)，仍有擴(kuò)增分別為39.89和39.63。

3.對(duì)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后，過二天后對(duì)該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陰性。

移液器污染測(cè)試結(jié)果

持續(xù)監(jiān)測(cè)

本次污染事件中從發(fā)現(xiàn)到清理測(cè)試后，*恢復(fù)了實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。雖然可以確定的是樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器發(fā)生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多，移液器是否是污染因素我們很難確定。后續(xù)的幾天仍然在檢測(cè)中增加陰性對(duì)照，持續(xù)對(duì)環(huán)境等樣品進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確保污染被*清除。

BIOBASE核酸清除劑，強(qiáng)烈推薦?。。?/span>

適用于PCR實(shí)驗(yàn)室儀器、耗材和空氣氣溶膠等的核酸清除，可有效降低環(huán)境中核酸污染對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的干擾。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

無揮發(fā)

無毒無害，對(duì)人體、環(huán)境無污染

無腐蝕，不損傷儀器設(shè)備

能夠有效清除核酸污染

10-30℃的環(huán)境下可保存6個(gè)月